Ứng dụng phương pháp MALDI-TOF MS trong phân lập các chủng vi khuẩn Riemerella anatipestifer gây bệnh nhiễm trùng huyết trên thủy cầm tại tỉnh Hà Nam

Bệnh nhiễm trùng huyết do vi khuẩn Riemerella anatipestifer (RA) được coi là bệnh truyền nhiễm quan trọng trên thủy cầm gây thiệt hại lớn ở nhiều tỉnh thành tại Việt Nam trong nhiều năm.

Hiện nay, ứng dụng công nghệ mới trong phân lập, giám định và định danh vi khuẩn gây bệnh trên vật nuôi ngày càng phổ biến trên thế giới, trong đó có phương pháp phân tích phân tử ion hóa nhờ matrix, lazer, thời gian bay và dựa trên khối phổ protein (MALDI-TOF MS). Trong khi đó, vi khuẩn RA đã được phân lập và xác định thành công bởi phương pháp MALDI-TOF MS từ các ca lâm sàng trên chim bồ câu, ngỗng và vịt ở nhiều nơi trên thế giới. Đây là nghiên cứu đầu tiên tại Việt Nam được cán bộ Phòng thí nghiệm trọng điểm công nghệ sinh học Thú y học viện Nông nghiệp Việt Nam ứng dụng phương pháp MALDI-TOF MS để xét nghiệm phân lập vi khuẩn RA trên thủy cầm tại tỉnh Hà Nam.

 A: Tư thế chết ngã ngửa; B: Phân xanh-trắng; C: Triệu chứng thần kinh; D: Viêm màng phủ fibrin tim, gan vịt; E: viêm màng túi khí; F: Sung huyết, xuất huyết não

Trong nghiên cứu này, 27 chủng vi khuẩn sau khi phân lập được sử dụng để giám định và định danh bằng phương pháp MALDI-TOF MS. Kết quả trình cho thấy cả 27 chủng vi khuẩn được định danh là vi khuẩn RA với các điểm log của dao động từ 2,080 – 2,360 cho thấy độ chính xác ở mức độ loài các nhất.

Ảnh hệ thống MALDI TOF MS và kết quả xét nghiệm

Tất cả 27 chủng vi khuẩn RA đã được định danh bởi phương pháp MALDI-TOF MS đều cho kết quả tương đồng 100% với phản ứng PCR sử dụng cặp mồi đặc hiệu gene ribonuclease. Với kết quả này, có thể thấy việc sử dụng phương pháp MALDI-TOF MS có nhiều lợi thế: giá thành xét nghiệm rẻ, độ đặc hiệu cao, cho phép xác định nhanh, chính xác nguyên nhân gây bệnh trong vòng 24 giờ, để từ đó kịp thời đưa ra các giải pháp và phác đồ điều trị bệnh hiệu quả. Qua nghiên cứu này cho thấy, phương pháp MALDI-TOF MS cho kết quả định danh vi khuẩn ngắn hơn (30 giây/ 1 mẫu vi khuẩn) và rẻ hơn so với phương pháp PCR truyền thống được sử dụng phổ biến trong các nghiên cứu trong nước và trên thế giới. Định dạng protein bằng phương pháp khối phổ đã được chứng minh là một phương pháp nhanh chóng và đáng tin cậy để xác định vi khuẩn RA.

Thông tin chi tiết truy cập tại: http://tapchi.vnua.edu.vn/wp-content/uploads/2022/01/tap-chi-so-2.8.pdf